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Polysciences 23966 線性聚乙烯亞胺(瞬時(shí)轉(zhuǎn)染級(jí),分子量 25,000)介紹

更新時(shí)間:2026-04-30      點(diǎn)擊次數(shù):382

基本信息

• 英文全名:Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade (PEI 25K™)

• 中文譯名:線性聚乙烯亞胺(瞬時(shí)轉(zhuǎn)染級(jí),分子量 25,000)

• 產(chǎn)品貨號(hào):23966

• 品牌:Polysciences

• CAS 登錄號(hào):9002-98-6, 26913-06-4

• 外觀形態(tài):白色至淡黃色固體

• 分子量:約 25,000 Da

• 分子式:(C?H?N)?

• 熔點(diǎn):73-75°C

• 溶解性:本品可溶于熱水;在低 pH 值的冷水中亦可良好溶解;此外,還可溶于甲醇和乙醇等極性有機(jī)溶劑。本品不溶于苯以及丙酮等非極性或弱極性有機(jī)溶劑。

• 儲(chǔ)存條件:室溫(RT)密閉避光保存。

• 主要用途:作為一款可信賴且具成本效益的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑,廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)生命科學(xué)研究、重組蛋白生產(chǎn)以及基因治療載體的開(kāi)發(fā)。

這款 PEI 25K 產(chǎn)品經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的理化性質(zhì)表征與生物功能性測(cè)試,確保了其在不同批次間的高一致性。它不僅能夠滿足科研人員在 96 孔板等小規(guī)模篩選實(shí)驗(yàn)中的高通量需求,更能夠穩(wěn)健地放大至 100 升乃至更大規(guī)模的不銹鋼生物反應(yīng)器中進(jìn)行工業(yè)化蛋白表達(dá)或病毒載體生產(chǎn)。每年,全球都有大量的研究機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)選擇使用 Polysciences/Kyfora Bio 的 PEI 25K,以期在其科研探索或生產(chǎn)工藝中獲得關(guān)鍵的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)與成本優(yōu)化。

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產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 轉(zhuǎn)染效率與表達(dá)水平

   本品在 HEK293 及 CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)等常見(jiàn)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中,展現(xiàn)出了極為出色的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染效率。即使在大規(guī)模生物反應(yīng)器的復(fù)雜流體動(dòng)力學(xué)環(huán)境中,它依然能夠介導(dǎo)外源基因的高效攝取,從而確保目標(biāo)重組蛋白的高水平表達(dá)。

2. 廣泛的工藝 scalability(可放大性)

   從微孔板的高通量篩選,到搖瓶的工藝開(kāi)發(fā),再到一次性生物反應(yīng)器和百升級(jí)別的不銹鋼生物反應(yīng)器,本品的性能表現(xiàn)具有高度的線性可預(yù)測(cè)性。這種無(wú)縫放大的能力極大地縮短了從實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)到臨床前或商業(yè)化生產(chǎn)的開(kāi)發(fā)周期。

3. 顯著的成本效益優(yōu)勢(shì)

   相較于市面上許多昂貴的商業(yè)化專有轉(zhuǎn)染試劑,研究人員和生產(chǎn)企業(yè)可以使用本品在內(nèi)部自行配制轉(zhuǎn)染復(fù)合物。這種做法通常可以將單次轉(zhuǎn)染的總試劑成本降低可觀的比例(在特定工藝優(yōu)化下最高可達(dá) 40%),對(duì)于需要大規(guī)模質(zhì)粒遞送的基因治療和生物制藥行業(yè)而言,這種成本優(yōu)勢(shì)直接轉(zhuǎn)化為巨大的經(jīng)濟(jì)效益。

4. 高純度與低細(xì)胞毒性

   作為一款專為生物工藝設(shè)計(jì)的原料,本品具有高的化學(xué)純度,并且經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的核酸酶、內(nèi)毒素等污染物檢測(cè)。其優(yōu)化的分子量分布和線性結(jié)構(gòu)使其在保證高效基因遞送的同時(shí),將對(duì)宿主細(xì)胞的毒性降至低,從而維持良好的細(xì)胞活率和代謝狀態(tài)。

5. 批次間高度一致,符合法規(guī)要求

   Polysciences/Kyfora Bio 遵循嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系和生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),確保每一瓶出廠的 PEI 25K 都具有高度一致的理化特性和生物活性。這種可靠性對(duì)于需要長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行的生物工藝開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)至關(guān)重要。


儲(chǔ)存與溶液配制條件

• 原粉儲(chǔ)存:本品以固體粉末或塊狀形式提供,化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定。建議在室溫(15-25°C)下密閉、避光保存。只要保持干燥并確保容器密封良好,其 shelf life(保質(zhì)期)較長(zhǎng),無(wú)需冷藏或冷凍,這也為大規(guī)模倉(cāng)儲(chǔ)管理提供了便利。

• 工作液配制:

   由于聚乙烯亞胺易吸潮且具有一定的吸濕性,在稱量時(shí)需迅速操作。通常建議將本品溶解于無(wú)菌的酸性純水(如使用 0.1 N 的 HCl 調(diào)節(jié)超純水或 PBS 的 pH 至 4.0-5.0)中,配制成濃度為 1 mg/mL 甚至更高濃度(如 10 mg/mL)的儲(chǔ)存液。配制過(guò)程中可適當(dāng)加熱(如 37°C 水浴)并劇烈渦旋以促進(jìn)其全溶解。溶解后的儲(chǔ)存液若短期(數(shù)周)內(nèi)頻繁使用,可室溫存放;若長(zhǎng)期保存,建議分裝后置于 4°C 冷藏,防止微生物污染。

• 防污染提示:

   由于本品在偏酸性水溶液中具有良好的溶解性,而在中性或堿性條件下容易析出結(jié)晶或產(chǎn)生沉淀,因此在配制儲(chǔ)存液及稀釋時(shí)務(wù)必控制好 pH 值。同時(shí),為了避免工作液在操作過(guò)程中被細(xì)菌或霉菌污染,整個(gè)配制過(guò)程應(yīng)在生物安全柜或超凈工作臺(tái)中進(jìn)行,并使用無(wú)菌的無(wú)內(nèi)毒素離心管和移液器吸頭。


工作原理

聚乙烯亞胺(PEI)作為一種經(jīng)典的陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,其核心工作機(jī)制建立在“質(zhì)子海綿效應(yīng)(Proton Sponge Effect)"以及靜電相互作用的基礎(chǔ)之上。

1. 復(fù)合物的自發(fā)組裝

   在酸性至中性的生理環(huán)境(如 pH 7.2-7.4)下,PEI 分子鏈上含有大量的仲胺和叔胺基團(tuán),這些基團(tuán)會(huì)發(fā)生質(zhì)子化,使得 PEI 帶有強(qiáng)烈的“正電荷"。而核酸分子(如質(zhì)粒 DNA、siRNA 或用于基因編輯的 CRISPR/Cas9 系統(tǒng))的磷酸骨架則帶有“負(fù)電荷"。當(dāng)兩者在適當(dāng)?shù)柠}離子濃度下混合時(shí),正負(fù)電荷會(huì)通過(guò)靜電引力迅速中和,自發(fā)組裝形成納米級(jí)別的 PEI/DNA 多元復(fù)合物(Polyplexes)。

2. 細(xì)胞攝取與內(nèi)吞作用

   這些帶微弱正電荷或不帶電的納米復(fù)合物能夠通過(guò)與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜相互作用,被細(xì)胞通過(guò)網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用(Clathrin-mediated endocytosis)或非特異性液相內(nèi)吞作用高效攝取進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。

3. 內(nèi)涵體逃逸(Endosomal Escape)

   這是 PEI 發(fā)揮轉(zhuǎn)染作用最核心的機(jī)制——質(zhì)子海綿效應(yīng)。當(dāng)復(fù)合物被包裹在細(xì)胞內(nèi)吞形成的早期內(nèi)涵體(Early Endosome)中時(shí),內(nèi)涵體會(huì)不斷酸化以降低其內(nèi)部 pH 值。此時(shí),PEI 分子中大量未質(zhì)子化的叔胺基團(tuán)充當(dāng)了“質(zhì)子緩沖劑",吸收內(nèi)涵體內(nèi)多余的氫離子,導(dǎo)致內(nèi)涵體內(nèi)發(fā)生滲透性腫脹并最終破裂。這一過(guò)程不僅保護(hù)了核酸免受溶酶體的降解,還成功地將核酸釋放到了細(xì)胞質(zhì)中。

4. 核定位與基因表達(dá)

   釋放到細(xì)胞質(zhì)中的質(zhì)粒 DNA 隨后需要進(jìn)入細(xì)胞核才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯。在細(xì)胞分裂期,核膜發(fā)生破裂與重建,這為質(zhì)粒 DNA 進(jìn)入細(xì)胞核提供了天然的途徑。一旦進(jìn)入細(xì)胞核,外源基因就會(huì)在宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄機(jī)制作用下開(kāi)始表達(dá),從而產(chǎn)生目標(biāo)重組蛋白或?qū)崿F(xiàn)基因的沉默與編輯。


解決實(shí)驗(yàn)中的哪些痛點(diǎn)與問(wèn)題

在生物制藥研發(fā)和前沿生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)中,研究人員經(jīng)常面臨基因遞送效率低、毒性大、成本高昂以及工藝難以放大等棘手問(wèn)題。本品正是為了解決這些核心痛點(diǎn)而生的:

1. 破解重組蛋白大規(guī)模表達(dá)的“成本困局"

   在利用 HEK293 或 CHO 細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體或疫苗抗原時(shí),傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑成本高,往往令科研人員望而卻步。本品作為一種可自主配制的化學(xué)合成聚合物,使得科研機(jī)構(gòu)能夠以極低的物料成本實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的蛋白表達(dá),將寶貴的經(jīng)費(fèi)集中在下游的純化與表征上。

2. 突破難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系(如原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞)的“效率瓶頸"

   某些特殊細(xì)胞系(如原代培養(yǎng)的神經(jīng)元、造血干細(xì)胞或某些上皮細(xì)胞)對(duì)外源基因的攝取能力極差。PEI 25K 憑借其獨(dú)特的陽(yáng)離子密度和分子量特征,能夠有效壓縮大片段質(zhì)粒,并通過(guò)高效的質(zhì)子海綿效應(yīng)促進(jìn)內(nèi)涵體逃逸,從而在這些“頑固化"的細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)可觀的轉(zhuǎn)染效率。

3. 攻克病毒載體包裝(如慢病毒、AAV)的“滴度壁壘"

   在基因治療領(lǐng)域,高滴度病毒載體的制備是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。無(wú)論是用于體外細(xì)胞改造的慢病毒(Lentivirus),還是用于治療體內(nèi)遞送的腺相關(guān)病毒(AAV),其包裝過(guò)程都需要將多種質(zhì)粒高效地共轉(zhuǎn)染進(jìn)包裝細(xì)胞系(如 HEK293T)。本品能夠輕松應(yīng)對(duì)多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的復(fù)雜需求,顯著提升病毒包裝的產(chǎn)率與滴度。

4. 消除工藝放大過(guò)程中的“性能衰減"隱患

   從實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的 6 孔板,到 5L 的一次性生物反應(yīng)器,再到百升級(jí)的生產(chǎn)罐,培養(yǎng)體積和流體動(dòng)力學(xué)的改變往往會(huì)導(dǎo)致許多轉(zhuǎn)染試劑的性能急劇下降。而本品具有出色的流體力學(xué)穩(wěn)定性,其轉(zhuǎn)染效率在從微量滴定板到百升級(jí)生物反應(yīng)器的不同規(guī)模間具有高度的線性相關(guān)性,極大地降低了工藝放大的技術(shù)門(mén)檻和失敗風(fēng)險(xiǎn)。

5. 規(guī)避血清干擾,簡(jiǎn)化操作步驟

   許多脂質(zhì)體類轉(zhuǎn)染試劑要求必須在無(wú)血清條件下進(jìn)行轉(zhuǎn)染復(fù)合物的孵育,甚至在轉(zhuǎn)染后需要更換培養(yǎng)基,這不僅增加了操作的繁瑣程度,也容易對(duì)敏感細(xì)胞造成滲透壓沖擊。而 PEI 25K 對(duì)血清的存在具有較高的容忍度,在某些情況下甚至可以在含有血清的培養(yǎng)基中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,大大提升了實(shí)驗(yàn)的通量和便捷性。


使用方法與操作指南

為了獲得最佳的轉(zhuǎn)染效果,建議用戶在正式實(shí)驗(yàn)前建立該產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP),并進(jìn)行小規(guī)模的條件摸索(如優(yōu)化 DNA 與 PEI 的質(zhì)量比、細(xì)胞接種密度以及復(fù)合物孵育時(shí)間等)。以下是基于 HEK293 或 CHO 懸浮細(xì)胞在搖瓶或生物反應(yīng)器中進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的典型操作流程框架:

一、 轉(zhuǎn)染前準(zhǔn)備

1. 細(xì)胞狀態(tài)調(diào)控:確保待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,且細(xì)胞活力(Viability)高于 95%。對(duì)于貼壁細(xì)胞,應(yīng)在轉(zhuǎn)染前 24 小時(shí)鋪板,使其在轉(zhuǎn)染時(shí)達(dá)到 70%-90% 的融合度;對(duì)于懸浮細(xì)胞,應(yīng)將細(xì)胞密度調(diào)整至適宜范圍(通常為 1.0 - 2.0 × 10? cells/mL)。

2. 試劑預(yù)熱與平衡:將細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)菌 PBS(pH 7.2-7.4)以及配制好的 PEI 25K 工作液(如 1 mg/mL)提前置于 37°C 水浴中預(yù)熱平衡。

二、 轉(zhuǎn)染復(fù)合物的制備

1. 質(zhì)粒 DNA 的稀釋:根據(jù)轉(zhuǎn)染體系的總體積,計(jì)算出所需質(zhì)粒 DNA 的量(例如,每毫升細(xì)胞懸液使用 1-2 µg 質(zhì)粒)。將質(zhì)粒 DNA 加入適量(通常為體系體積的 1/10 到 1/20)的預(yù)熱 PBS 或基礎(chǔ)培養(yǎng)基(無(wú)血清)中,輕輕混勻。

2. PEI 工作液的稀釋與加入:按照預(yù)先設(shè)定的 DNA:PEI 質(zhì)量比(通常范圍為 1:2 到 1:6,經(jīng)典起始比例為 1:3),取相應(yīng)體積的 PEI 25K 工作液加入上述稀釋好的 DNA 溶液中。

3. 復(fù)合物孵育:將混合液在室溫下輕柔渦旋或上下顛倒混勻,隨后靜置孵育 15 至 30 分鐘。在此期間,PEI 與 DNA 會(huì)自組裝形成尺寸均一的納米轉(zhuǎn)染復(fù)合物。

三、 轉(zhuǎn)染操作

1. 直接加入體系:將孵化好的 PEI/DNA 復(fù)合物直接滴加至細(xì)胞培養(yǎng)液中。對(duì)于貼壁細(xì)胞,建議將復(fù)合物均勻滴加到培養(yǎng)基中并輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板使其分散;對(duì)于懸浮細(xì)胞,可直接加入搖瓶或生物反應(yīng)器中,并適度提高攪拌速率以確保均勻分布。

2. 培養(yǎng)與觀察:將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱(通常為 37°C,5% CO?,適宜濕度)繼續(xù)培養(yǎng)。在轉(zhuǎn)染后 6 到 24 小時(shí)內(nèi),可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)決定是否更換新鮮培養(yǎng)基以去除復(fù)合物毒性。

四、 后續(xù)分析與收獲

1. 表達(dá)監(jiān)測(cè):在轉(zhuǎn)染后 24、48、72 小時(shí),可通過(guò)熒光顯微鏡(若質(zhì)粒攜帶熒光報(bào)告基因)、流式細(xì)胞術(shù)或 ELISA/Western Blot 等手段監(jiān)測(cè)目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞活力。

2. 產(chǎn)物收獲:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模诒磉_(dá)峰值期間收集細(xì)胞上清液(用于分泌型蛋白)或裂解細(xì)胞(用于胞內(nèi)蛋白),進(jìn)行后續(xù)的純化或功能驗(yàn)證。

(注:上述步驟為通用指南,具體參數(shù)需根據(jù)您的特定細(xì)胞系、質(zhì)粒特性以及培養(yǎng)體系進(jìn)行優(yōu)化。)


常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案(Troubleshooting Guide)

在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)操作中,由于細(xì)胞狀態(tài)、質(zhì)粒質(zhì)量、培養(yǎng)環(huán)境等諸多變量的影響,可能會(huì)遇到轉(zhuǎn)染效率不佳、細(xì)胞死亡等嚴(yán)重等問(wèn)題。以下整理了本品在使用過(guò)程中最常見(jiàn)的問(wèn)題及其背后的科學(xué)歸因與解決策略:

問(wèn)題 1:轉(zhuǎn)染效率極低,幾乎檢測(cè)不到目標(biāo)基因的表達(dá)

可能原因分析與對(duì)策:

• 質(zhì)粒純度不達(dá)標(biāo):轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒必須具有高純度(A260/A280 比值在 1.8-2.0 之間)且內(nèi)毒素含量極低(< 0.1 EU/µg)。內(nèi)毒素不僅會(huì)嚴(yán)重抑制許多細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率,還會(huì)引發(fā)細(xì)胞毒性。建議改用高純度無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒重新制備 DNA。

• DNA 與 PEI 比例不當(dāng):不同的細(xì)胞系和質(zhì)粒構(gòu)建體有其最適的電荷比率(N/P ratio)。若比例過(guò)低,復(fù)合物無(wú)法有效形成;若比例過(guò)高,則會(huì)對(duì)細(xì)胞造成嚴(yán)重毒性。建議以 1:2 為起點(diǎn),設(shè)置 1:3、1:4、1:5 等多個(gè)梯度進(jìn)行比例優(yōu)化。

• 復(fù)合物孵育時(shí)間不足或過(guò)度:孵育時(shí)間太短會(huì)導(dǎo)致復(fù)合物組裝不全,太長(zhǎng)則可能導(dǎo)致復(fù)合物顆粒過(guò)大而被細(xì)胞吞噬的效率下降。嚴(yán)格控制孵育時(shí)間在 15-30 分鐘為宜。

問(wèn)題 2:轉(zhuǎn)染后細(xì)胞大量死亡,細(xì)胞活力急劇下降

可能原因分析與對(duì)策:

• PEI 殘留毒性:聚乙烯亞胺本身帶有一定細(xì)胞毒性,尤其是在大劑量使用時(shí)。如果在小規(guī)模實(shí)驗(yàn)中,可以考慮在轉(zhuǎn)染后 18-24 小時(shí)更換一次新鮮的預(yù)溫培養(yǎng)基,以洗去未被細(xì)胞吸收的游離 PEI。

• 細(xì)胞密度不適宜:細(xì)胞過(guò)密會(huì)導(dǎo)致接觸抑制,降低內(nèi)吞作用;細(xì)胞過(guò)稀則在轉(zhuǎn)染應(yīng)激下容易死亡。務(wù)必在轉(zhuǎn)染前確保細(xì)胞處于最佳的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。

• 培養(yǎng)基成分干擾:雖然 PEI 對(duì)血清有較好的耐受性,但某些特定成分(如特定的抗生素或添加劑)可能會(huì)與 PEI 發(fā)生不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)。嘗試在轉(zhuǎn)染時(shí)使用不含抗生素的培養(yǎng)基。

問(wèn)題 3:實(shí)驗(yàn)重復(fù)性很差,不同批次或孔間差異明顯

可能原因分析與對(duì)策:

• 加樣操作誤差:在手工操作時(shí),滴加復(fù)合物的部位和混合的均勻程度會(huì)極大影響局部細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。建議在使用移液器滴加復(fù)合物時(shí),沿著培養(yǎng)液液面緩慢、均勻地打入,并輕輕晃動(dòng)容器混勻。

• 細(xì)胞狀態(tài)不均一:如果細(xì)胞在傳代過(guò)程中出現(xiàn)了分化或狀態(tài)老化,其轉(zhuǎn)染能力會(huì)大打折扣。盡量使用傳代次數(shù)較少(如 < 30 代)且形態(tài)飽滿的年輕細(xì)胞。

• PEI 工作液未充分混勻或降解:PEI 儲(chǔ)存液在低溫下可能會(huì)變得粘稠甚至析出。使用前務(wù)必將其恢復(fù)至室溫,并充分渦旋震蕩以確保溶液均一。若發(fā)現(xiàn)儲(chǔ)存液出現(xiàn)渾濁或顏色異常加深,建議棄用并重新配制。

問(wèn)題 4:在大規(guī)模生物反應(yīng)器中轉(zhuǎn)染效果遠(yuǎn)不如小規(guī)模搖瓶

可能原因分析與對(duì)策:

• 混合方式不當(dāng):在幾升乃至上百升的反應(yīng)器中,單純依靠攪拌槳產(chǎn)生的流體剪切力可能不足以瞬間將粘稠的 PEI 和 DNA 混合均勻。建議采用“離線預(yù)混合法(Off-line Complexation)",即在獨(dú)立容器中先按比例混合并孵育好轉(zhuǎn)染復(fù)合物,然后再通過(guò)蠕動(dòng)泵緩慢、均勻地泵入主反應(yīng)罐中。

• 通氣與起泡影響:大規(guī)模培養(yǎng)中通常伴隨著強(qiáng)烈的通氣攪拌,過(guò)多的泡沫會(huì)吸附并破壞轉(zhuǎn)染復(fù)合物。可以適當(dāng)降低攪拌轉(zhuǎn)速,或在培養(yǎng)基中添加適量的消泡劑(需預(yù)先驗(yàn)證消泡劑對(duì)轉(zhuǎn)染的影響)。

問(wèn)題 5:目標(biāo)蛋白表達(dá)量尚可,但伴隨大量細(xì)胞碎片和聚集體

可能原因分析與對(duì)策:

• 復(fù)合物粒徑過(guò)大:當(dāng) DNA 濃度過(guò)高或混合速度過(guò)快時(shí),容易形成微米級(jí)的粗大沉淀,這些沉淀不僅無(wú)法被細(xì)胞高效內(nèi)吞,還會(huì)引發(fā)細(xì)胞的異物反應(yīng)。優(yōu)化混合手法,采用緩慢滴加并配合輕柔混勻的方式可以有效減小復(fù)合物粒徑。

• 細(xì)胞凋亡被觸發(fā):高水平的外源基因表達(dá)本身就會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)代謝負(fù)擔(dān)。檢查生物反應(yīng)器的溶氧(DO)、pH 以及營(yíng)養(yǎng)物(葡萄糖、谷氨酰胺)濃度,確保在轉(zhuǎn)染期間細(xì)胞處于優(yōu)的生存微環(huán)境中。


關(guān)鍵詞聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑、PEI 25K說(shuō)明書(shū)、線性PEI瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、Polysciences PEI 25K、Kyfora Bio PEI、貨號(hào)23966 PEI、PEI轉(zhuǎn)染慢病毒包裝、HEK293瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PEI、CHO細(xì)胞瞬轉(zhuǎn)試劑、PEI 25kda轉(zhuǎn)染效率、線性聚乙烯亞胺分子量25000、無(wú)動(dòng)物源瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑、大規(guī)模蛋白表達(dá)轉(zhuǎn)染試劑、PEI DNA復(fù)合物配制、穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建慢病毒、腺相關(guān)病毒AAV包裝試劑、低成本瞬轉(zhuǎn)試劑PEI、非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑、質(zhì)子海綿效應(yīng)轉(zhuǎn)染機(jī)制、生物反應(yīng)器瞬時(shí)轉(zhuǎn)染工藝


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??賣(mài)產(chǎn)品

貨號(hào)

品名

規(guī)格

品牌

23966-1

線性PEI 25000 

1g

Polysciences

24765-1

PEI MAX 

1g

Polysciences

18606-20

Aqua-Poly/Mount

20ml

Polysciences

24765-100

PEI MAX 

100mg

Polysciences

86057-3

BioMag®Plus Concanavalin A

3ml

Polysciences

23966-100

線性PEI 25000 

100mg

Polysciences

21759-1

Nylon Wool Fiber, Sterile (尼龍毛柱)

10 syringes

Polysciences

18369-50

Nylon Wool Fiber

50g

Polysciences

86057-10

BioMagPlus Concanavalin A

10ml

Polysciences

24885-2

Polyethylenimine Hydrochloride Linear (MW 4000)

2g

Polysciences

26008-5

Transporter 5 Transfection Reagent

5ml

Polysciences

26293-B (Custom)

Poly(methyl methacrylate) aka PMMA 15 kD

500g

Polysciences

18417-1

迪康70

1L

Polysciences

18545-250

Poly(acrylamide/acrylic acid) [60:40]

250g

Polysciences

25563-500

Polyacrylonitrile, homopolymer, MW 200,000 25014-41-9

500g

Polysciences

49553-93-7

線性PEI MAX 分子量40000

1g

Polysciences

08226-15

Polybead® Carboxylate Microspheres 1.00μm

15 ml

Polysciences

18606-100

Aqua-Poly/Mount

100 ml

Polysciences

18613-250

Poly(acrylic acid), sodium salt, 20% soln. in water [MW ~ 225,000]

250 g

Polysciences

09836-15

Polybead® Carboxylate Microspheres 0.50μm

15ml

Polysciences

24158-5

Streptavidin microspheres

5ml

Polysciences

24313-2

POLYETHYLENIMINE LINEAR MW 2500

2g

Polysciences

09780-100

Poly(dimethylsiloxane-b-ethylene oxide), methyl terminated

100g

Polysciences

08691-10

Polybead® Microspheres 0.05μm

10ml

Polysciences

17154-10

Fluoresbrite YG Microspheres 1.00um

10ml

Polysciences

08210-100

Poly(ethylene glycol) diglycidyl ether (PEGDGE 400)

100g

Polysciences

24350-1

PolyLink Protein Coupling Kit

1 kit

Polysciences

19394-5

Fluoresbrite® YO Carboxylate Microspheres 4.50µm

5ml

Polysciences

26293-100

Poly(methyl methacrylate) (MW ~15000)

100g

Polysciences

07379-12

Tweezers, 5 Dumont INOX, Super Thin tips

dozen

Polysciences

24336-100

Microdispers-8000

100g

Polysciences

86011-10

BioMag®Plus Carboxyl

10 ml

Polysciences

64030-15

Skip to the beginning of the images gallery Microbead 

NIST Traceable Particle Size Standard, 1.00μm

15 ml

Polysciences

06519-250

Poly(acrylic acid), 50% soln. in water [MW ~ 5,000]

250g

Polysciences

26289-500

Polycaprolactone, MW 50000 Pellets

500g

Polysciences

17140-5

Polybead® Carboxylate Microspheres 4.50μm

5ml

Polysciences

25673-25

Skip to the beginning of the images gallery 

Poly(allylamine hydrochloride), MW 150000, 40% aq. soln.

25g

Polysciences

08207-50

Poly(methyl methacrylate/methacrylic acid) [90:10] 25086-15-1

50g

Polysciences

02215-1

Diethylene glycol diacrylate (DEGDA)

1kg

Polysciences

24762-1

Uranyl Formate

1g

Polysciences

09850-5

Polybead® Carboxylate Microspheres 3.00μm

5ml

Polysciences

00578-50

Poly(methacrylic acid)

50g

Polysciences

86057-3ml

BioMag®Plus Concanavalin A

3ml

Polysciences

18329-5

Skip to the beginning of the images gallery Polybead® Microspheres 20.00μm

5ml

Polysciences

18369-10

Nylon Wool Fiber

10g

Polysciences

16662-10

Fluoresbrite® YG Carboxylate Microspheres 0.10μm

10ml

Polysciences

21116-1

Fluoresbrite® 641 Carboxylate Microspheres 0.50μm

1ml

Polysciences

09730-25

Poly(L-lysine hydrobromide), MW 125K, 0.1% aq. soln.

25ml

Polysciences

19508-2

Fluoresbrite® Polychromatic Red Microspheres 2.0μm

2ml

Polysciences

08209-100

Poly(ethylene glycol) diglycidyl ether (PEGDGE 200)

100g

Polysciences

15700-10

Fluoresbrite® YG Carboxylate Microspheres 0.50μm

10ml

Polysciences

17951-500

Mowiol® 4-88

500g

Polysciences

BLI832-1

Submicron Bead Calibration Kit (0.2μm, 0.5μm, 0.8μm)

1 kit

Polysciences

07307-15

Polybead Microspheres 0.50μm

15ml

Polysciences

24293-5

Polybead Black Dyed Microspheres 6.00um

5ml

Polysciences

25113-1

PolyFreeze 綠色包埋劑

Polysciences

84200-10

BioMag® Superparamagnetic Iron Oxide, ~10μm

10ml

Polysciences

06519-1

Poly(acrylic acid), 50% soln. in water [MW ~ 5,000]

1kg

Polysciences

25114-1

PolyFreeze 黃色包埋劑

Polysciences

07314-5

Polybead:emoji Microspheres 45.00µm

5ml

Polysciences

23591-100

Methacryloxyethyl thiocarbamoyl rhodamine B

100mg

Polysciences

BLI252A-1

QuantumPlex™M Streptavidin ~6µm Magnetic

5x1 ml

Polysciences

00876-15

Polybead Microspheres 0.10μm

15ml

Polysciences

09809-5

N,N'-Cystaminebisacrylamide, Electro Pure™; 60984-57-8

5g

Polysciences

BLI816B-5

Quantum™ Simply Cellular® anti-Human IgG

5 ml

Polysciences

17740-5

Fast Blue (FB)

5mg

Polysciences

18613

Poly(acrylic acid), sodium salt, 20% soln. in water [MW ~ 225,000]

500g

Polysciences

24200-1

Periodic Acid Schiff's (PAS) Stain Kit

1 kit

Polysciences

15178-10

Polyethylene glycol dimethacrylate

10g

Polysciences

16300-250

CMCP-10 High viscosity mountant

250 ml

Polysciences

25343-1.5

Silica Microspheres - Dry, 1.0µm

1.5g

Polysciences

WBE28A12E

28 Liter General Purpose Water Bath

ea

Polysciences

01595-25

TDMAC (Tridodecylmethylammonium chloride)

25mg

Polysciences

24049-5

Polybead® Microspheres 75.00µm

5 ml

Polysciences

19130-10

Polybead® Poly(methyl methacrylate) Microspheres - Broad Distribution

10ml

Polysciences

22505-10

Poly(D,L-lactic acid), IV 0.2 dl/g

10g

Polysciences

004-300062

PolyScience(polyclear mix30)

1.9 L

Polysciences

25404-100

Skip to the beginning of the images gallery Acryloxyethyl thiocarbamoyl Rhodamine B

100 mg

Polysciences

18140-2

Fluoresbrite® YG Microspheres 10.0µm

2ml

Polysciences

17134-15

Polybead® Microspheres 3.00µm

15 ml

Polysciences

17138-15

Polybead® Polystyrene Blue Dyed Microspheres 3.00μm

15 ml

Polysciences

19129-10

Polybead® Hydroxylate Microspheres 2.00μm

10ml

Polysciences

26435-1

MAXgene® GMP Transfection Reagent, Powder

1g

Polysciences

08792-1

Poly/Bed® 812 (Luft formulations) Embedding Kit/DMP-30

1 kit

Polysciences

21958-1

Poly/Bed® 812 (Luft formulations) Mini Kit

1 kit

Polysciences

21844-1

Poly/Bed® 812 Embedding Kit/BDMA (Glauert Version)

1 kit

Polysciences

21959-1

Poly/Bed® 812 Mini Kit/BDMA (Glauert Version)

1 kit

Polysciences

17147-5

Fluoresbrite Yellow Green Carboxylate Microspheres, 3.00 µm

5ml

Polysciences

18242-2

Fluoresbrite® YG Microspheres 45.0µm

2ml

Polysciences

17136-5

Polybead® Microspheres 10.00µm

5ml

Polysciences

02975-100

Poly(vinyl alcohol), MW 25000, 88% hydrolyzed

100g

Polysciences

24913-25

Grids - Formvar Coated - Nickel 200 mesh

25 grids

Polysciences

14475-500

DOTAP Chloride

500mg

Polysciences

18522-100

Poly(acrylamide/sodium acrylate) [70:30]

100g

Polysciences

004-300063

polyclear MIX 30 PLUS (5 Pack)

5 Pack

Polysciences

17649-100

Polyballs - Teflon, 1/8" Diameter

100balls

Polysciences

16688-15

Polybead® Carboxylate Microspheres 0.10μm

15ml

Polysciences

06090-25

Skip to the beginning of the images gallery Polyethylenimine, 

Branched, Mw 70,000, 30% w/v aq. soln. (bPEI 70000 30% soln.)

25g

Polysciences

18241-2

Fluoresbrite® YG Microspheres 25.0µm

2ml

Polysciences

19096-2

Fluoresbrite® YG Microspheres 20.0µm

2ml

Polysciences


上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號(hào)上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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