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美國NanoLight Technologies授權代理商-上海起發(fā)

更新時間:2026-05-28      點擊次數(shù):166

▌一、關于公司

NanoLight® Technologies 是 Prolume Ltd. 旗下專注于海洋生物發(fā)光技術應用的技術分部,致力于將海洋來源的天然發(fā)光蛋白與發(fā)光底物的研究積累,轉化為可供科研與產業(yè)界日常使用的標準化試劑體系。

與依靠昆蟲螢光素系統(tǒng)(如螢火蟲熒光素酶)的傳統(tǒng)路線不同,NanoLight 所深耕的方向來自深海──從橈足類、水母、介形類等海洋發(fā)光生物中鑒定、重組并規(guī)模制備具備實用價值的發(fā)光蛋白(熒光素酶)及其對應底物(腔腸素及其衍生物),再通過純化工藝、配方設計與批次質控,把它們做成可以在普通實驗室條件下穩(wěn)定儲存、可靠復現(xiàn)的試劑產品。

NanoLight 目前提供的產品覆蓋以下幾大功能模塊:

• NanoFuels® —— 各類發(fā)光底物與配套溶劑/緩沖體系(腔腸素及其衍生物、水溶性改性版本、專用溶劑等)

• NanoLights® —— 重組熒光素酶蛋白、發(fā)光蛋白及對應表達體系(Gaussia、Renilla、Oplophorous/NanoKAZ 等)

• NanoFluors™ —— 熒光蛋白相關表達工具

• NanoTools —— 功能性偶聯(lián)物與檢測輔助試劑(如鏈霉親和素偶聯(lián)熒光素酶、多克隆/單克隆抗血清等)

這些模塊既可以獨立使用,也可以組合成完整的報告基因檢測、分子互作檢測或活體成像工作流,服務于基礎科研、藥物研發(fā)、分子診斷及農業(yè)化學品篩選等多個方向。

中國地區(qū)相關產品的商務對接與技術支持,由授權代理商 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 承接。


?? 下圖為上海起發(fā)實驗劑有限公司作為美國NanoLight Technologies授權代理商的授權書

nanolight.png

▌二、核心優(yōu)勢

① 發(fā)光蛋白譜系完整,分子量小、適配靈活

NanoLight 最核心的蛋白資產之一是高斯熒光素酶(Gaussia luciferase,GLuc)體系。GLuc 來源于海洋橈足類 Gaussia princeps,是一種分泌型熒光素酶,單體分子量僅約 19 kDa,屬于已知發(fā)光強度較高的小型熒光素酶之一。由于它是分泌型的,表達后可將蛋白直接釋放到細胞培養(yǎng)上清中,這意味著:

• 檢測時往往不需要裂解細胞,取少量上清即可讀數(shù);

• 可以設計縱向時間序列實驗,在同一孔中連續(xù)追蹤同一樣本的發(fā)光變化;

• 對貼壁與懸浮體系均適用,兼容 96 孔 / 384 孔及更高密度板。

與之并列的還有海腎熒光素酶(Renilla luciferase,RLuc)體系與 Oplophorous 來源的 NanoKAZ/NLuc 體系,三者各有不同的動力學特征(閃光型 vs 較持續(xù)的輝光型傾向)、不同的最適底物譜與不同的分子量/結構約束,研究者可根據(jù)實驗目標做匹配選擇──而不是被綁定在某一種酶的單一特性上。

② 底物家族覆蓋全面,關鍵衍生物的引入拓展了應用場景邊界

腔腸素(Coelenterazine)本身是一種對氧敏感的發(fā)光底物,天然狀態(tài)下疏水性強、溶解度有限,這在活體成像或較大體積體系中容易變成瓶頸。NanoLight 圍繞這一核心分子做了系統(tǒng)的衍生物與配方延伸:

• native Coelenterazine(CTZ):經典底物,適合體外體系與 BRET 等基礎框架

• h?Coelenterazine(CTZ?h):苯環(huán)取代衍生物,發(fā)光峰值偏藍移,在特定 BRET 配置中是常用選項

• Coelenterazine?SOL(水溶性改性版本):通過配方層面的溶解性優(yōu)化,使底物更適合體內注射、微循環(huán)擴散與較長觀測窗口的實驗

• Prolume Purple™:一種進一步結構優(yōu)化的腔腸素類似物,在蛋白質?蛋白質相互作用研究中被用于替代早期常用的 DeepBlueC™ 路線,發(fā)光顏色更深紫/藍,背景更低

• Methoxy?eCTZ 等其他變體:為特定波長需求與特定酶動力學提供額外調節(jié)余地

此外,NanoLight 不只賣"裸底物粉末",還配套提供 NanoFuel® Solvent 等專用復溶劑與 5× Universal Lysis Buffer 等預制緩沖液,使研究者不必自行試錯配制溶劑體系。

③ 凍干保護氣封裝 + 室溫和控溫運輸策略,到貨穩(wěn)定性更有保障

多數(shù) NanoLight 的腔腸素類底物以 凍干(lyophilized)/干燥形式 提供,并在密封管中充入保護性氣體。這一做法的直接好處是:

• 大幅降低底物在運輸途中因溶液態(tài)氧化降解而失活的風險;

• 在不少品規(guī)下可以實現(xiàn)室溫或普通冷鏈即可運輸(具體以每件產品的說明書建議溫度為準),減輕國際運輸鏈條中的溫控壓力;

• 抵達實驗室后,使用者按說明書指示用指定溶劑復溶,分裝凍存,即可進入常規(guī)實驗循環(huán)。

對于國內課題組而言,這意味著從下單到拿到可用試劑的鏈路更穩(wěn)定,批次間差異也更容易通過廠家側的統(tǒng)一質控來壓制。

④ 信號半衰期經過緩沖體系優(yōu)化,適配高通量讀數(shù)與縱向監(jiān)測

生物發(fā)光反應中有一類常見困擾:加底物后信號迅速達峰然后陡降("flash"行為),導致多板操作用戶在"加底物→讀數(shù)"的時間差里引入系統(tǒng)性偏移。

NanoLight 的若干檢測試劑(以 GLuc GLOW Assay / NLuc GLOW Assay 等為代表)在設計上引入了配套緩沖環(huán)境,使發(fā)光信號從單純的瞬閃型向更平緩的輝光(glow)型過渡,信號穩(wěn)定窗口可延展到數(shù)十分鐘乃至數(shù)小時量級(例如 GLuc 體系在合適配方下信號半衰期可達約 2–3 小時的區(qū)間,實際數(shù)值受溫度、pH、底物濃度、細胞體系影響)。這種延展帶來的實際意義是:

• 多塊 384 孔板的自動化讀數(shù)中,先后順序造成的信號落差變??;

• 手工操作的小平臺也能獲得可重復的讀值,不需要注射式讀板機也可起步;

• 時間序列采樣不必擔心"因為讀數(shù)間隔拉長就丟信號"。

⑤ 可定制空間大,愿意接"標準目錄之外"的需求

除目錄化常規(guī)品外,NanoLight 也提供面向特定需求的定制試劑服務──比如特殊規(guī)格的底物、特定偶聯(lián)形式的酶(GLuc?SA / NLuc?SA 這類鏈霉親和素偶聯(lián)物已在目錄中,但更復雜的項目可走溝通定制路線)、或與客戶聯(lián)合確定實驗參數(shù)建議。對于做長期篩選平臺建設的藥企 / CRO 而言,這種靈活性意味著試劑供應不是一個黑盒,而是可以隨項目一起演化的合作環(huán)節(jié)。


▌三、熱門產品介紹

◆ 3.1 腔腸素類底物(Coelenterazine 家族 · NanoFuels®)

? 品名:Coelenterazine(天然腔腸素 / CTZ)

產品特點

Coelenterazine 是多種海洋生物發(fā)光系統(tǒng)的共同底物/輔因子,能在對應熒光素酶(如 Renilla luciferase、Gaussia luciferase 等)催化下與氧氣反應,釋放出光子。它在 BRET 體系、體外熒光素酶報告檢測、以及部分體外分子互作檢測中是基礎底物選項。

存儲條件

• 原始凍干粉:通常建議 ≤ –20 ℃ 避光干燥保存,管內為保護氣氛密封;

• 復溶后:依說明書用推薦溶劑(如 NanoFuel Solvent 或無水乙醇/甲醇體系,具體以隨批 COA 為準)溶解,分裝后 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光保存,避免反復凍融;

• 操作中盡量避光、避免接觸強氧化劑。

工作原理

在熒光素酶存在時,Coelenterazine 被氧化脫羧,同時發(fā)射光子(峰值波長因酶/底物組合而不同,常見在 400–490 nm 附近)。發(fā)光強度在一定范圍內與酶量或酶活性正相關,因此可通過讀板機定量反推報告基因表達水平、或監(jiān)測酶標體系中催化劑的存在狀態(tài)。

使用方法(典型體外 RLuc / GLuc 檢測中的通用順序)

1. 按說明書將凍干 CTZ 用指定溶劑全溶解,配成儲備液(例如 1–5 mM,具體濃度依實驗設計);

2. 將培養(yǎng)終止后的細胞裂解液(或培養(yǎng)上清,若測分泌型 GLuc)轉移至不透光/黑板;

3. 加入預定體積的 CTZ 工作液(終濃度通常在微摩爾級,需預實驗優(yōu)化);

4. 輕柔混勻,靜置短暫平衡(通常數(shù)十秒到數(shù)分鐘),放入讀板機設定好積分時間讀數(shù);

5. 每次建議做標準曲線或同批陽性對照,以校正底物活力與儀器響應。

? 品名:h?Coelenterazine(CTZ?h)

產品特點

CTZ?h 是在腔腸素苯環(huán)位引入取代基的衍生物,發(fā)光光譜相對天然 CTZ 有一定藍移,在 BRET1 或 BRET2 配置(以 RLuc 為能量供體、以 GFP/YFP 等為受體的融合蛋白體系)中常被選用。它的化學穩(wěn)定性與溶解性仍需要避光低溫管理,但信號特征與天然 CTZ 有所區(qū)分,給了波長匹配更多余地。

存儲條件

與 CTZ 類似:凍干粉 ≤ –20 ℃ 避光干燥;復溶后分裝避光冷凍保存,盡量減少空氣接觸。

工作原理

與 CTZ 相同催化氧化發(fā)光原理;區(qū)別在于供體發(fā)光峰與受體激發(fā)峰之間的光譜重疊程度不同,研究者可以通過更換為 CTZ?h 來調整 FRET/BRET 通道串擾與動態(tài)范圍。

使用方法(BRET 簡要框架)

1. 預先用 CTZ?h(或 CTZ)工作液孵育表達 RLuc?融合蛋白的細胞/裂解液;

2. 供體(RLuc)發(fā)光的同時,若空間上靠近的受體(如 YFP)在 F?rster 半徑內,則發(fā)生非輻射能量轉移,受體發(fā)出自身特征熒光;

3. 分別讀取供體通道(~480 nm 附近)與受體通道(~530 nm 附近,依受體而定),計算 BRET 比值 = 受體信號 / 供體信號;

4. 藥物或突變引起的構象變化/解離會使比值下降,從而實現(xiàn)活細胞內蛋白質互作的動態(tài)追蹤。

? 品名:Coelenterazine?SOL(水溶性腔腸素,體內成像專用版本)

產品特點

這是腔腸素家族中針對體內應用做過溶解性改良的版本。普通 CTZ 在水相中極易析出,直接尾靜脈或腹腔注射時常需助溶劑(DMSO/乙醇比例一高就對小鼠有刺激),而 Coelenterazine?SOL 的目標是在可接受注射體積內保持底物可溶、分散均勻,從而讓活體生物發(fā)光信號更強、分布更可控。

存儲條件

凍干粉形態(tài)同樣建議冷凍避光干燥保存;復溶時使用配套或說明書中允許的溶劑體系(通常為水性緩沖+輔助溶劑的混合),制備成可注射的工作液后一般 冰上短期放置、盡快使用,長時間存放仍以凍存分裝為佳。

工作原理

與 CTZ 全一致──仍然是熒光素酶催化底物氧化反應發(fā)光,只不過這里的光子源位于活體動物內部(腫瘤細胞、免疫細胞、轉基因報告小鼠等表達熒光素酶的組織),穿過組織衰減后被 IVIS 類活體成像系統(tǒng)接收。

使用方法(活體成像通用流程)

1. 確認動物模型已成功表達目標熒光素酶(如通過質粒、慢病毒、AAV 或轉基因);

2. 按體重計算 Coelenterazine?SOL 注射劑量,經指定途徑(常見為腹腔 IP 或尾靜脈 IV)給藥;

3. 等待底物分布平衡(通常數(shù)分鐘,依底物動力學與給藥途徑而定,常見 5–20 min 窗口需預實驗標定);

4. 麻醉動物并放入活體成像系統(tǒng)采集光子圖;

5. 同一批動物可在合理間隔后復用(需留出底物代謝清除時間),用于腫瘤生長縱向監(jiān)測。

? 品名:Prolume Purple™(紫色發(fā)光腔腸素類似物)

產品特點

Prolume Purple 是一種經過結構修飾的腔腸素類似物,其發(fā)光峰值進一步向短波/紫藍光推移(名義上在 ~540–590 nm 激發(fā)態(tài)轉移體系下的表現(xiàn)被用來與經典 DeepBlueC™ 做比較),在需要更低背景、更特定波長窗口的蛋白質互作或特殊報告配置中提供額外的底物選項。

存儲條件

凍干粉末避光冷凍保存;復溶分裝避光凍存,操作全程注意避光與低溫。

工作原理

仍然是基于熒光素酶?腔腸素氧化發(fā)光框架,但發(fā)光光譜與化學穩(wěn)定性改變后,更適合某些對藍色通道串擾敏感的檢測布局──例如部分 BRET 或蛋白質片段互補(PCA)場景中,需要用紫色/藍紫信號與綠色熒光通道拉開距離。

使用方法

基本與 CTZ?h / CTZ 流程一致,核心差異在于工作濃度與檢測波長設置需要根據(jù)所用酶(多為 RLuc 衍生變體)重新優(yōu)化,建議始終做無酶空白與飽和酶對照來框定動態(tài)范圍。

◆ 3.2 熒光素酶蛋白試劑(NanoLights®)

? 品名:Native Gaussia Luciferase(天然高斯熒光素酶,重組蛋白)

產品特點

GLuc 是以分泌型著稱的小型熒光素酶,單體約 19 kDa,無需細胞裂解即可在上清中檢測到強發(fā)光信號。NanoLight 提供的重組 GLuc 為純化蛋白形式(典型純度標示可達 95% 級別),適合用作:

• 陽性對照(標定底物活性 / 讀板機響應)

• 體外直接催化體系搭建(如傳感器構建、體外偶聯(lián)檢測原型驗證)

• 與鏈霉親和素偶聯(lián)版本(GLuc?SA)搭配形成"捕獲→發(fā)光讀出"的雙抗夾心或生物素化分子檢測路線

存儲條件

凍干或溶液形態(tài)依具體交付規(guī)格而定,一般要求 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光保存,避免反復凍融;含蛋白的溶液態(tài)制品尤其要注意防止表面吸附損失(可用低濃度 carrier protein 或硅化管協(xié)助穩(wěn)定,具體依說明書)。

工作原理

GLuc 催化腔腸素類底物(特別是 CTZ / CTZ?h,也視情形用其他衍生物)氧化發(fā)光。由于它是分泌型酶的重組形式,不存在亞細胞定位遮擋問題──加入底物即反應,因此很適合做"酶量?發(fā)光值"的標準曲線。

使用方法(直接酶活檢測舉例)

1. 用合適的緩沖液(如 PBS 或 Tris?pH 7.4,視體系而定)稀釋 GLuc 儲備液到工作濃度;

2. 加入 CTZ 工作液(終濃度依預實驗定,常見在 1–10 µM 量級的范圍做梯度測試);

3. 即刻或短暫孵育后讀發(fā)光值;

4. 若做標準曲線,至少設 5–6 個倍比稀釋點,R2 > 0.99 的區(qū)間才是后續(xù)樣品定量可信區(qū)間。

? 品名:Gaussia Luciferase?Streptavidin 偶聯(lián)物(GLuc?SA)

產品特點

將 GLuc 共價偶聯(lián)到鏈霉親和素(Streptavidin)上,利用 SA 對生物素(biotin)的強親和力(Kd ~ 10?1? M 級),使研究者可以把"生物素化探針 → SA 捕獲 → 發(fā)光讀出"串聯(lián)起來。常見用途包括:檢測生物素化 DNA/RNA、多肽、蛋白,或作為免疫檢測中的報告臂(先用生物素化一抗/二抗捕獲目標,再用 GLuc?SA 發(fā)光讀出)。

存儲條件

蛋白偶聯(lián)物對 freeze?thaw 更敏感,通常建議分裝凍存(–20 ℃ 或 –80 ℃),含穩(wěn)定劑(甘油/BSA 依批注而定),操作中冰上放置、用低吸附管。

工作原理

本質仍是 GLuc 催化 CTZ 發(fā)光,只是 GLuc 現(xiàn)在被"錨定"在 SA 上,而 SA 又通過四個亞基同時結合多個生物素位點──這一放大結構使得在固相(板/bead)或原位捕獲場景中,發(fā)光信號可以被有效富集到局部空間再讀出。

使用方法(生物素化分子檢測示意)

1. 將捕獲層(如鏈霉親和素包被板,或反向:目標分子的特異性捕獲抗體包被板)準備好;

2. 加入含生物素化待測分子的樣本,完成結合;

3. 洗板后,加入 GLuc?SA 偶聯(lián)物孵育,使 SA 結合殘余/鄰近的游離生物素位點或設計好的橋接位點;

4. 再次洗滌去除未結合偶聯(lián)物,加入 CTZ 底物讀發(fā)光。

? 品名:NLuc?SA(Oplophorous 來源 NanoKAZ/NLuc 的鏈霉親和素偶聯(lián)物)

與 GLuc?SA 平行的另一條路線。NLuc(NanoLuc®/NanoKAZ 體系,來源于深海蝦 Oplophorus gracilirostris)同樣是小型熒光素酶,且在某些工程化變體中以"較持久輝光 + 小分子底物"著稱。NanoLight 將其做成 SA 偶聯(lián)形式,用途同上(生物素化分子檢測、報告放大),底物通常會配對選用與其動力學匹配的腔腸素衍生物或專屬底物體系。

存儲條件:同類蛋白偶聯(lián)物規(guī)范,凍存分裝、避反復凍融、含穩(wěn)定劑配方依批次 COA。

◆ 3.3 預制檢測試劑盒與配套緩沖液

? 品名:GLuc GLOW Assay(高斯熒光素酶 輝光型檢測試劑)

產品特點

這是一套面向分泌型 GLuc 的"接近單步"發(fā)光檢測體系,核心改進在于把底物與緩沖環(huán)境配成能讓發(fā)光信號在數(shù)分鐘到數(shù)小時內保持相對平穩(wěn)的輝光態(tài),從而緩解 flash 型底物那種"加完底物 10 秒內就得讀完"的操作焦慮。

存儲條件

試劑盒各組分依標簽標識存放──通常液體試劑 4 ℃ 或 –20 ℃(視批次而定),避光;凍干組件按凍干品管理。開封后依照說明書建議的有效期窗使用(一般 1–3 個月不等,以實際標注為準)。

工作原理

GLuc 分泌到上清中 → 取等量或按比例稀釋的上清 + 加入預混的檢測試劑(含 CTZ 或其衍生物 + 輝光緩沖)→ 反應生成持續(xù)發(fā)光 → 讀板機積分讀數(shù) ∝ 酶量 ∝ 驅動 GLuc 的啟動子/信號通路活性。

使用方法(常規(guī) 96 孔示例)

1. 細胞培養(yǎng)到指定時間點(如藥物處理 6 h / 24 h / 48 h);

2. 若需要細胞計數(shù)歸一化,可另取一塊平行板做 DNA/蛋白歸一化,或在同板做完發(fā)光后補做 MTT/CCK/BCA(注意相互干擾,建議分開板);

3. 取 10–50 µL 上清轉入黑板(不透光底更佳),加入等體積或說明書指定比例的 GLuc GLOW 試劑;

4. 混勻、室溫靜置(常見 5–30 min,取決于體系與期望的穩(wěn)定平臺),設定讀板機積分時間(如 0.5–5 s/well)讀數(shù);

5. 數(shù)據(jù)表達為 RLU(相對發(fā)光單位),組間比較需固定培養(yǎng)密度、加樣體積與讀數(shù)延遲時間。

? 品名:NLuc GLOW Assay(NanoKAZ/NLuc 輝光型檢測試劑)

流程與 GLuc GLOW 類似,但配對的是 NLuc/NanoKAZ 體系,底物配方對應 Oplophorous 系腔腸素衍生物。對于胞內表達 NLuc 的情形,通常需要先做輕微裂解(或使用 NanoFuel 5× Universal Lysis Buffer 這類預制裂解液),再取裂解上清進行發(fā)光讀數(shù)。

? 品名:Firefly Luciferase Assay Reagent(螢火蟲熒光素酶檢測試劑)

NanoLight 同樣提供螢火蟲(Firefly)方向的發(fā)光檢測試劑,用于那些已經建立在 firefly luciferase(Fluc)+ D?熒光素體系上的傳統(tǒng)報告基因平臺。Fluc 信號通常在 ATP/Mg2?/氧氣存在下催化 D?熒光素氧化發(fā)光,與 GLuc/RLuc 分屬不同波長區(qū)間,兩者可組成 雙報告系統(tǒng)(如 Fluc 做測試、RLuc/GLuc 做內參),前提是底物加入順序與波長拆分設置正確。

? 品名:NanoFuel® Solvent(專用復溶劑)

產品特點

不是所有溶劑都等于"能溶腔腸素又不殺細胞"。NanoFuel Solvent 的定位是為凍干腔腸素類底物提供一條可控的復溶路徑:足夠溶解力、足夠純凈、批次間揮發(fā)殘留與酸堿性受控。

存儲條件

室溫或 4 ℃ 密封保存,避免敞口揮發(fā)與水分吸入;遠離氧化劑與強堿。

使用方法

按產品頁/COA 標示的 mg→mL 換算,將溶劑精確加入凍干管,輕柔渦旋至全溶解(通常呈淡黃色至無色,若有微量不溶顆粒需按說明是否離心/過濾),即為儲備液。此后按實驗所需濃度用緩沖液二次稀釋──不要把高濃度儲備液直接當工作液加到細胞上,有機溶劑終濃度往往需要對細胞做耐受測試(常見要求 < 0.5–1% v/v)。

? 品名:NanoFuel® 5× Universal Lysis Buffer(5× 通用裂解液)

產品特點

為報告基因檢測提供預制的高濃度裂解基底(含去污劑/緩沖鹽體系),使用時按 1× 稀釋后與細胞孵育,釋放胞內熒光素酶但不使其過度變性,隨后直接與對應底物試劑配對讀數(shù)。

存儲條件

通常 4 ℃ 或 –20 ℃(視具體批次標簽),避免反復室溫放置;若見渾濁或析出,按說明書指示是否允許溫和混勻或是否需要換新分裝。

◆ 3.4 螢火蟲熒光素(Firefly Luciferin)

? 品名:Firefly Luciferin Free Acid(D?熒光素游離酸)

產品特點

螢火蟲發(fā)光體系的底物,F(xiàn)luc 的經典搭檔??捎糜隗w外裂解液檢測,也可用于 Fluc 轉基因小鼠的活體成像(經腹腔/尾靜脈給予 D?熒光素鈉鹽或游離酸轉鈉后的溶液──體外化學轉化依規(guī)程)。

存儲條件

凍干粉末避光、干燥、≤ –20 ℃ 保存;復溶后分裝 –20 ℃ / –80 ℃ 避光,避免反復凍融與氧化。


▌四、它可以解決實驗里的哪些具體問題

? 低豐度信號檢不出、背景吃掉一切

傳統(tǒng)的一些報告基因檢測在弱啟動子、負調控、或下游信號被部分抑制時,會出現(xiàn)"信號剛出噪聲線"的情況。NanoLight 的小型海洋熒光素酶體系(尤其分泌型 GLuc)因為單位酶量產光能力強、發(fā)光法本身沒有外源激發(fā)光背景(不像熒光法要扛自發(fā)熒光),在低背景環(huán)境中能把微弱變化拉開到可量化范圍。對那些需要檢測 轉錄抑制程度、miRNA 靶向效應、信號通路微調 的項目來說,這種背景優(yōu)勢是實質收益。

? 閃光型底物太快,"加完底物手就抖"

讀板機一次只能讀一塊板,但如果你有 6 塊 384 孔板等著讀,而底物在加完后 30 秒內達峰、90 秒衰減過半──你得到的不是生物學差異,是"先加先衰"的操作偽影。

GLuc/NLuc GLOW 類型的配方思路正是針對這一點:把反應推進到更可控的穩(wěn)態(tài)段,使讀數(shù)窗口從"秒級競賽"變成"十分鐘可從容讀完一塊板"的節(jié)奏,多板之間的差異更多回到孔間真值而非操作時序。

? 腔腸素難溶、體內成像信號彌散

CTZ 直接扔進水里不溶,用高比例有機助溶劑又刺激動物──這導致活體成像時要么信號弱、要么分布怪、要么動物狀態(tài)受影響。Coelenterazine?SOL 這條產品線存在的理由就是把這個"溶解?注射?擴散?毒性"三角矛盾往可行方向推一步:可注射的水相容性更好,信號在組織中的富集更有規(guī)律,腫瘤生長曲線可以更干凈。

? 同位素法能出數(shù)但安全管理成本高

部分傳統(tǒng)方法依賴 3H/32P 或 12?I 標記,靈敏但帶來輻射安全許可、廢物處置、人員培訓與設備隔離等一系列組織成本。NanoLight 的非放射性發(fā)光報告體系并不能聲稱"處處比同位素更靈敏"(尤其在單分子計數(shù)意義上),但在絕大多數(shù)細胞水平報告基因、互作追蹤、篩選讀出場景中,它提供足夠的靈敏度,且日常管理回到"化學品 + 生物安全二級常規(guī)規(guī)范"的范疇,對平臺長期運行更友好。

? 雙報告 / 多通道拆分需要光譜正交性

當你需要同時歸一化(如 Fluc 做測試、RLuc 做內參),或用 BRET 做活細胞互作(供體發(fā)光→受體熒光),你需要供體與受體的光譜有足夠間距。NanoLight 提供 CTZ / CTZ?h / Prolume Purple 等不同光譜特征的底物,加上 GLuc / RLuc / NLuc 不同波長傾向的酶,等于給了你一套可調的"波長調色盤",讓雙通道串擾可以被實驗設計壓下去。

? 批量篩選需要批次一致性,不能每批換個性狀

藥企或 screening core 的痛點之一是:試劑批次一換,整條 dose?response 曲線漂移,歷史數(shù)據(jù)對齊困難。NanoLight 在底物生產中采用批次控制策略(凍干工藝、保護氣封裝、COA 對關鍵參數(shù)留檔),目的就是把"試劑"這件基礎變量盡可能做成定值而不是噪聲源。


▌五、購買與使用中的常見疑問(Q & A)

Q1:我是第一次用 GLuc 系統(tǒng),應該買哪些東西起步?

A:最小起步組合通常是「GLuc 報告基因載體/表達系統(tǒng)(從你熟悉的分子生物學渠道獲取)」+「CTZ 或 CTZ?h 底物」+「NanoFuel Solvent」;如果想省去自己調緩沖的麻煩,可直接選 GLuc GLOW Assay 試劑盒。建議第一批同時訂購一個小規(guī)格的 Native Gaussia Luciferase 重組蛋白 作為陽性對照──它能幫你判斷"底物有沒有活性、讀板機通道對不對、稀釋倍數(shù)是否落在線性區(qū)",比盲調細胞快很多。

Q2:腔腸素類底物看起來怕光怕氧,收到后怎么轉存最穩(wěn)?

A:到貨后立即檢查包裝是否完整、管蓋是否密封。凍干粉先原管 –20 ℃ 或 –80 ℃ 避光放好,不要提前打開。只有準備做實驗時才取出一支、按說明書加 NanoFuel Solvent 全溶解→分裝成單次用量小份(如 10–20 µL/管)→標好濃度、日期、批號→回凍。日常工作中,永遠假設腔腸素在溶液態(tài)是倒計時狀態(tài),所以分裝 > 反復凍融,避光 > 省這一步鋁箔。

Q3:你們說可室溫運輸,是不是代表它不怕常溫?

A:不是。凍干保護氣封裝提升了運輸韌性,不等于"隨便放桌上一個月也沒事"。運輸是為了到達,到達后的規(guī)范是:凍干粉冷凍避光、復溶后冷凍避光分裝。這是所有腔腸素類產品的通用紀律。

Q4:體內成像我該選 CTZ?SOL 還是普通 CTZ?

A:只要你的路徑是給活鼠注射然后在 IVIS 上采圖,優(yōu)先選 Coelenterazine?SOL(或專門標明 in vivo 用途的品規(guī))。普通 CTZ 的溶解性問題會在注射環(huán)節(jié)反噬──底物析出堵針、分布不均、信號飄忽。即便用 SOL 版本,也要按文獻/說明書確認注射體積、劑量、采圖延遲時間這三者的匹配關系,最好在自己實驗室條件下先做一只 pilot 標定信號—時間曲線。

Q5:GLuc 是分泌型的,我能不能只用上清、不裂不做標準曲線?

A:可以做上清直讀,這是 GLuc 的優(yōu)勢。但需要提醒兩點:第一,分泌效率受細胞狀態(tài)、培養(yǎng)基血清含量、孔邊緣效應影響,如果各孔間細胞數(shù)差異大(如藥物本身有增殖/毒性),只報 RLU 不加歸一化會引入系統(tǒng)偏差──此時建議平行板做蛋白/DNA 歸一化,或用 RLuc/Fluc 做第二報告歸一化。第二,上清直讀的"線性范圍"仍然需要你用重組 GLuc 蛋白跑一次標準曲線來確認──不要默認任意稀釋度都在線性區(qū)。

Q6:BRET 實驗到底選 CTZ 還是 CTZ?h 還是 Prolume Purple?

A:取決于你的受體是什么。經典 RLuc ? GFP10/YFP 體系里,CTZ 與 CTZ?h 都是常見選項;CTZ?h 的藍移發(fā)光有時能改善供體/受體通道分光效果。Prolume Purple 則面向那些"需要更紫的光、更低供體通道串入受體通道"的配置,或用于特定 PCA(蛋白質片段互補)架構。穩(wěn)妥的建議是:不要只看供體峰在哪里,要看最終 BRET 比值(受體/供體)的動態(tài)范圍與 S/B(信號/背景)在你自己的細胞系里實測值是多少──理論光譜和細胞里實際光學環(huán)境經常有出入。

Q7:你們的試劑盒和市面其他品牌的熒光素酶檢測試劑盒有什么區(qū)別?

A:NanoLight 的差異化不在于泛用熒光素/螢火蟲方向(那里競爭已經很成熟),而在于它自身的源頭資產──海洋熒光素酶(GLuc / RLuc / NLuc)及其腔腸素底物家族的垂直整合:底物是自己做的、偶聯(lián)物是自己做的、緩沖配方是與底物動力學一起調過的。這意味著如果你的項目本來就建在 GLuc 或 RLuc 上,用同平臺的 NanoFuel 配套溶劑/檢測試劑,變量更少、調試鏈路更短。如果你用的是 Firefly 體系且沒有海洋熒光素酶需求,那 Firefly 檢測試劑部分更多是作為平臺補充存在,選型時按自己實驗室已有習慣與報價走即可。

Q8:采購時是否需要特殊資質?

A:NanoLight 的大部分目錄產品屬于科研用生化試劑/酶/底物范疇,不屬于管制化學品或放射性源,常規(guī)實驗室采購流程即可。但具體入境清關與校內?;?劇品臺賬歸類請以所在機構國資/安全辦要求為準──部分有機溶劑溶劑瓶(NanoFuel Solvent)在標簽上可能帶有易燃液體標識,倉儲時注意遠離明火與熱源。

Q9:如果我想做大批量篩選(HTS),你們能否保證批次持續(xù)供貨?

A:這是 NanoLight 明確提到的服務方向之一──為底物與緩沖體系提供批次控制與規(guī)?;桓?。具體到大批量定制規(guī)格、交貨期、COA 參數(shù)范圍、最小起訂量,需要在采購前由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 協(xié)助與廠家側確認項目需求(預計月消耗量、所需品規(guī)、希望的交付節(jié)奏),再做書面確認。不建議直接按零售品規(guī)"手動乘以 100"來推定大批量行為──大批量真正的隱性成本是批次一致性,而不是單價小數(shù)點后幾位。

Q10:運輸途中萬一冷鏈斷了怎么辦?凍干粉還能用嗎?

A:這也是為什么 NanoLight 主流品以"凍干+保護氣"出貨──它對溫度波動的容忍度顯著高于溶液態(tài)。但"更能扛"不等于"隨便扛"。收貨時建議檢查:外箱有無明顯破損、管內凍干餅是否移位碎裂、密封鋁帽是否完整。若運輸記錄顯示曾長時間超過標注儲存溫度上限,安全的做法是先拍照留證、暫不投入使用,聯(lián)系 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 走質量確認流程。多數(shù)情況下凍干粉性狀穩(wěn)定,但科學上是"外觀正?!倩钚哉?,關鍵實驗建議跑一次陽性對照酶(GLuc 重組蛋白 + 底物)驗證信號水平是否在歷史批間容差內。


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(注:本文內容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)


??賣產品

貨號

品名

規(guī)格

品牌

301-5

Lyophilized h-Coelenterazine (mono-dehydroxy derivative also called benzyl-CTZ) 99% 5 mgs

5mg

NanoLight Technologies

320-50

GLuc GLOW Assay

50ml

NanoLight Technologies

3011-500

Water soluble h-Coelenterazine for in vivo use. ( 500 ug),

500ug

NanoLight Technologies

321-100

Native Gaussia Luciferase 95%. Recombinant protein, 100ug. Comes with 1 x 1.5 ml reconstitution buffer.

15ml

NanoLight Technologies

369-1

Prolume Purple (PP-CTZ)

1mg

NanoLight Technologies

301-1

Coelenterazine h

1mg

NanoLight Technologies

3031

Coelenterazine-SOL (in vivo)

1mg

NanoLight Technologies

399-1

NanoFuel Solvent, optimized for in vitro use with CTZ native, h-CTZ, CTZ-F and CTZ 400a. 1 tube, 1 ml

1ml

NanoLight Technologies

399-10

NanoFuel Solvent, optimized for in vitro use with CTZ native, h-CTZ, CTZ-F and CTZ 400a. 1 tube, 10ml/tube.

10ml

NanoLight Technologies

340-1

Coelenterazine 400a

1mg

NanoLight Technologies

301-10

Lyophilized h-Coelenterazine (mono-dehydroxy derivative also called benzyl-CTZ) 99% 10mgs (2 x 5 mgs)

10mg

NanoLight Technologies

318-50

Firefly Luciferase Assay Reagent

50ml

NanoLight Technologies

369-10

Lyophilized Methoxy eCTZ,10 mgs

10mg

NanoLight Technologies

369-5

Lyophilized Methoxy eCTZ, 5 mgs

5mg

NanoLight Technologies

320-10

NanoFuel GLOW Assay for Gaussia Luciferase. Includes: 10ml reagent, 0.2ml CTZ substrate

10ml

NanoLight Technologies

305-1

CAT#305 Cypridina Luciferin

1mg

NanoLight Technologies

325-50

NLuc GLOW Assay

50ml

NanoLight Technologies

371-50

CAT#371 Gaussia Luciferase-Streptavidin

50ug

NanoLight Technologies

413364

Water soluble Coelenterazine for in vivo use. 10mgs (20x500 ug),

10mg

NanoLight Technologies

333-50

NanoFuel 5x Universal Lysis Buffer, 50ml

50ml

NanoLight Technologies

340-10

Lyophilized CTZ 400a,1-bisdeoxycoelenterazine,DI-dephdrocoelenterazine,"DeepBlueC". 98%, 10mgs (2 x 5 mgs)

10mg

NanoLight Technologies

301-500

Coelenterazine-h

500ug

NanoLight Technologies

355-1

Lyophilized e Coelenterazine, 1 mg( 2 x500ug).

2x500ug

NanoLight Technologies

355-500

e-Coelenterazine

500ug

NanoLight Technologies

603017

e-Coelenterazine-SOL (in vivo)

1 mg

NanoLight Technologies

361-250

CAT#361 Prolume Purple V

250ug

NanoLight Technologies

350-10

Coelenteramide, 10 mgs

10mg

NanoLight Technologies

346-500

e-Coelenterazine-F

500ug

NanoLight Technologies

401P

CAT#401P Polyclonal Antisera Gluc

250ul

NanoLight Technologies

346-1

CAT#346 e-Coelenterazine-F

1mg

NanoLight Technologies

363-250

CAT#363 Prolume Purple IV

250ug

NanoLight Technologies

365-1

Prolume Purple III

1mg

NanoLight Technologies

367-1

CAT#367 Prolume Purple II

1mg

NanoLight Technologies

369-500

Lyophilized Methoxy eCTZ, 500ug

500ug

NanoLight Technologies

654517

Prolume Purple- SOL (in vitro)

1tube

NanoLight Technologies

370-1

CAT#370 v-Coelenterazine

1mg

NanoLight Technologies

370-500

v-Coelenterazine

500ug

NanoLight Technologies

658169

v-Coelenterazine-SOL (in vitro)

1tube

NanoLight Technologies

381-100

NanoKaz Luciferase Protein, 100ug

100ug

NanoLight Technologies

397-1

NanoFuel-400a Solvent

1tube

NanoLight Technologies

397-10

NanoFuel-400a Solvent

1 x 10ml

NanoLight Technologies

398-1

Solvent for V-Coelenterazine and Prolume Purple V (Methoxy-v-Coelenterazine-Methoxy). 1 tube, 1 ml

1ml

NanoLight Technologies

398-10

Solvent for V-Coelenterazine and Prolume Purple V (Methoxy-v-Coelenterazine-Methoxy). 10 tubes, 1 ml/tube.

1ml

NanoLight Technologies

401M

CAT#401M Monoclonal Antisera Gluc

250ul

NanoLight Technologies

300-10

Coelenteramine, 4-(5-amino-6-benzylpyrazin-2-yl)phenol. 10 mgs

10mg

NanoLight Technologies

340-500

Coelenterazine 400a

500ug

NanoLight Technologies

405786

Water soluble h-Coelenterazine for in vivo use. 1mg (2x 500 ug),

1mg

NanoLight Technologies

406059

Water soluble h-Coelenterazine for in vivo use,10mg

10mg

NanoLight Technologies

406151

h-Coelenterazine-SOL (in vitro)

1tube

NanoLight Technologies

303-1

Lyophilized Native Coelenterazine free base 97% pure, 1 mg (2 x500ug)

2x500ug

NanoLight Technologies

303-5

Lyophilized Native Coelenterazine free base 97% pure, 500ug,

5mg

NanoLight Technologies

303-500

Coelenterazine native

500ug

NanoLight Technologies

413091

Water soluble coelenterazine for in vivo use. 1mg (2x 500 ug),

1mg

NanoLight Technologies

3031-500

Water soluble Coelenterazine for in vivo use. 500 ug,

500ug

NanoLight Technologies

413456

Water soluble Coelenterazine..Reconstitution in 10 ml aqueous buffer..will result in a 50 μM CTZ sol

1tube

NanoLight Technologies

413730

"Water soluble Coelenterazine. Reconstitution in 10 ml aqueous buffer. Will result in a 50 µM CTZ solution. For in vitro use. 10 tubes"

10tube

NanoLight Technologies

305-500

Cypridina Luciferin

500ug

NanoLight Technologies

306-250

Firefly Luciferin (Photinus species) D-Luciferin free acid, 250 mgs.

250mgs

NanoLight Technologies

307L-500

Aeqorin Photoprotein 95% pure, in liquid form, 500ul

500ul

NanoLight Technologies

312-100

Renilla Mullerei Luciferase (recombinant) 95% purity, 100ug

100ug

NanoLight Technologies

319-50

CAT#319 GLuc FLASH Assay

50ml

NanoLight Technologies

321-1

Native Gaussia Luciferase 95%. Recombinant protein 1mg. Comes with 1 x 1.5 ml reconstitution buffer.

15ml

NanoLight Technologies

324-50

NanoFuel FLASH Assay for Oplophorus Luciferases. Includes: 50ml reagent, 1ml substrate

50ml

NanoLight Technologies

325-10

NanoFuel GLOW Assay for Oplophorus Luciferases: Includes: 10ml reagent, 0.2ml substrate

10ml

NanoLight Technologies

340-5

Coelenterazine 400a

5mg

NanoLight Technologies

345-1

Lyophilized Coelenterazine-Flouride or Coelenterazine F. 1 mg(2 x500ug)

500ug

NanoLight Technologies

306-1000

Firefly Luciferin (Photinus species) D-Luciferin free acid, 1000mgs (4 x 250 mgs).

1000milligrams

NanoLight Technologies

306-500

Firefly Luciferin (Photinus species) D-Luciferin free acid, 500 mgs (2 x 250 mgs).

500milligrams

NanoLight Technologies

318L-50

NanoFuel Assay For Firefly Luciferase with Lysis. Includes: 50ml Buffer, 1 vial of Luciferin Substrate, 50ml of Lysis Buffer

50ml

NanoLight Technologies

318L-50FLucassaykit

FLuc Assay kit for Detection on firefly luciferase. 50ml for 1000reactions, 

buffer 50ml, Lot#B2722, substrate 1ml, Lot#B2722.50ml Universal Lysis buffer, Lot#F2822

2*50ml

NanoLight Technologies

303-10

Lyophilized Native Coelenterazine free base, 97% pure, 10mgs (2x5mgs),

2x5mg

NanoLight Technologies

325-50NLucGLOW

NLuc GLOW Assay kit for Oplophorus Luciferase. Kit contents:50ml NLuc GLOW buffer, Lot#F0322. 1ml 50x substrate,Lot#F0322

50ml

NanoLight Technologies


上海起發(fā)實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號上海起發(fā)實驗試劑有限公司
郵箱:xs1@78bio.com
傳真:021-50724961
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